Анализ ПЦР на хламидии

Иммуноферментный анализ

Согласно последним Федеральным рекомендациям, иммуноферментный анализ (ИФА) не применяется для диагностики неосложненного урогенитального хламидиоза (цервицитов, уретритов и др.). Такое «недоверие» обусловлено тем, что ИФА больше актуален для тяжелых, глубоких поражений хламидиями C. Trachomatis.

Метод ИФА основан на обнаружении в крови специфических антител, вырабатываемых в ответ на антигены хламидий. По сочетанию трех классов иммуноглобулинов в крови пациента можно судить о тяжести и длительности инфекционного процесса.

Как уже было сказано, данный метод при выявлении урогенитального хламидиоза имеет ряд недостатков:

1. 1Не информативен в диагностике восходящей инфекции, цервицита и уретрита.
2. 2Высокая частота перекрестных реакций.
3. 3Высока частота ложноположительных реакций.
4. 4Не подходит для контроля излеченности после проведенной антибактериальной терапии, так как неизвестно время существования в крови специфических антител;
5. 5Позволяет диагностировать преимущественно глубокие поражения, например, врожденный хламидиоз у новорожденных (класс рекомендаций А, уровень обоснованности I).

Для проведения ИФА используется венозная кровь пациента, взятая натощак. В защиту данного метода можно отметить:

1. 1Его более низкую стоимость, по сравнению с ПЦР.
2. 2Удовлетворительная специфичность порядка 90%.
3. 3Быстрота выполнения.
4. 4Простота забора и хранения материала.

Особенности забора материала у мужчин

Мужчины сдать анализы на хламидии могут у врача-уролога, врача-дерматовенеролога, врача-репродуктолога, андролога.

Материалами для исследования у мужчин обычно служат:

Отделяемое из уретры, соскоб из уретры. Подготовка пациента: перед забором материала не мочиться 2-3 часа, при обильных выделениях — 15-30 минут. При наличии обильных патологических выделений (например, гноя) рекомендуется удалить их ватным тампоном.

Процедура взятия соскоба для мужчин достаточно неприятна, порой болезненна. Соскоб забирается универсальным зондом из наружного отверстия уретры. После забора рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующей жидкостью.

• Первая порция свободно выпущенной мочи (чувствительность выше, чем у женщин — 85-95%).
• По показаниям для анализа на хламидии у мужчин может забираться секрет предстательной железы (при бесплодии, простатите и др. заболеваниях). Подготовка включает половое воздержание в течение 2 дней. Секрет простаты берет квалифицированный специалист после массажа предстательной железы.  Головку полового члена необходимо очистить стерильным ватным тампоном.

После завершения массажа выделившийся сок предстательной железы в количестве 0,5-1 мл собирают в сухую пробирку «Эппендорф» и плотно закрывают. При отсутствии секрета — собирают первую порцию мочи (в ней и будет содержаться весь секрет) по аналогии с обычной вышеописанной техникой.

Максимальный срок хранения всех вышеперечисленных материалов – 24 часа при строгом соблюдении температурного режима в диапазоне +2С…+8С.

Доставляется материал в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами. Для долгосрочного хранения взятый материал необходимо заморозить на срок не более 1 месяца при температуре -20С. Допускается только однократное размораживание материала.

Диагностика инфекции хламидиоз

Заболевание хламидиоз в организме человека в основном проходит в скрытой форме, и проявление этой инфекции происходит спустя 21 день после попадания в организм.

Внешнее обследование больного не может быть гарантией поставленного диагноза хламидиоз. Для того, чтобы установить правильный диагноз, необходимо провести ряд исследований:

• серологические исследования;
• микробиологические анализы;
• пройти метод генетического зонда;
• анализ на содержание иммуноферментов;
• ПЦР — диагностическая проверка.

Диагностику начинают с соскоба с уретры или влагалища, а также берется мазок выделения с уретры, влагалища и маточных выделений. По результатам данного анализа видна полная картина инфицированности хламидиозом. После того, как появился метод полимеразной цепной реакции, появилась возможность более точно определять наличие хламидий, уреаплазма и микоплазма в организме.

Имунноферментатный анализ выявляет наличие бактерий точностью от 60 до 70 процентов.

Для установки диагноза используют мазок, соскоб, сперму, мочу и кровь.

Как сдавать

Перед тем как сдать мазок ПЦР на хламидиоз, микоплазму и уреаплазму, необходимо уточнить у врача, какой именно материал будет забран в вашем случае.

В зависимости от диагноза и возбудителя, определяемого тестом, в качестве образцов забираемого материала может выступать:

• сперма;
• кровь;
• слюна;
• другие жидкости;
• иногда проводится ПЦР по моче.

Кровь у обоих полов для проведения анализа проводится путем забора 10-15 мл материала из локтевого участка кровеносной системы.

Женщины

У женщин забор жидкостей, образцов оболочек для проведения анализа ПЦР можно производить в следующих местах:

1. Внутренняя оболочка уретры.
2. Внутренняя оболочка влагалища. Для девочек соскоб делается из преддверия влагалища, чтобы избежать разрыва девственной плевы.
3. Синовиальная жидкость.
4. Цервикальный канал. Проводится мазок или соскоб. Мазок предпочтительнее, поскольку не создает болезненных эффектов, но точность анализа полимеразной цепной реакции в таком случае может быть незначительно снижена.
5. Конъюктивная слизистая оболочка. Внешняя оболочка глазного яблока или мазок под веком.

Сам анализ сдается в небольшой промежуток времени. Все зависит от области, откуда будет браться материал. К примеру, забор синовиальной жидкости, другими словами пункция суставного аппарата, происходит путем введения иглы большого диаметра — 0.8 мм. Это вызывает острые болезненные ощущения и может потребовать местной анестезии и, соответственно, занимает больше времени.

Для исследования и анализа ПЦР по моче, женщине необходимо предоставить материал, собранный утром в середине струи. При этом отбрасывают первые и последние две капли, в количестве 50 мл. Этим достигается высокая достоверность анализа, исключая возможные ошибки.

При беременности

Для всех случаев поступления беременных на учет в женскую консультацию обязательно назначают тест полимеразной цепной реакции на наличие хламидий и микоплазмы в организме.

Сам анализ сдается одним из способов:

• берется мазок с шейки матки;
• проба амниотической жидкости;
• исследование тканей плаценты.

В случае выявления инфекции в плодовых оболочках, таких как околоплодные воды, или в ткани самого плода, следует сделать анализ амниотической жидкости. Если срок уже большой, то будет проводиться изучение тканей плаценты.

Мужчины

У мужчин на анализ ПЦР на хламидиоз могут быть забраны образцы следующих слизистых оболочек:

• мазок из внутренней стенки уретры;
• мазок из коньюктивы (внешней оболочки глазного яблока, под веком);
• образец семенной жидкости;
• жидкость, выделяемая предстательной железой;
• синовиальная жидкость.

Выбор места забора осуществляется в зависимости от предполагаемого или уже диагностированного возбудителя. Для мужчин и парней, перед забором образца оболочек или жидкости, необходимо провести консультацию с дерматовенерологом и урологом. Это поспособствует более четкому определению предполагаемого заболевания и, как следствие, более точному результату анализа.

Расшифровка результатов анализа

В графе с названием теста может присутствовать формулировка:

• тип исследования: полимерный;
• тип исследования: иммуноферментный.

Это означает проведение тестов ПЦР количественных и качественных.

Если исследование проводится на предмет обнаружения бактерий-возбудителей, то:

• в графе с названием бактерии будет фигурировать название патологии (например микоплазмоз, уреаплазмоз);
• заболевания будут отмечены символами «+» или «-» в зависимости от результата.

Результат может быть:

1. Положительным (бактерия обнаружена), иногда обозначается в поле рядом с названием символом «+». Это свидетельствует о наличии в организме острого процесса и необходимо лечение или пациент является носителем заболевания.
2. Отрицательным (бактерия не обнаружена), также обозначаемая в некоторых случаях символом «-«.
3. Формулировка «отрицательный посев ПЦР». Это означает, что у пациента не обнаружена исследуемая инфекция, то есть человек здоров.

Преимущества данного метода

По сравнению с иммунологическими тестами, которые достаточно широко применяются, метод ПЦР отличается множеством неоспоримых преимуществ. Среди основных достоинств, которыми обладает данный анализ, можно отметить следующие:

1. Высокий и регулируемый уровень специфичности.
2. Высокая чувствительность, что позволяет выявлять инфекции, имеющие не только острый характер, но и латентный. Метод ПЦР с максимальной точностью определяет вирусы и единичные инфекции.
3. Возможность установить диагноз в течение достаточно короткого времени.

Стоимость ПЦР достаточно высока, однако абсолютная точность метода ее полностью компенсирует.

Анализ назначается в следующих случаях:

1. Заболевание имеет хронический характер.
2. Заболевание находится в острой фазе.
3. Во время беременности установлен отягощенный акушерский анамнез.
4. Бесплодие с неясным генезом.

Анализ крови может быть назначен и с целью проконтролировать эффективность применения антибактериальных методов лечения. В том случае, если у пациента был выявлен фрагмент ДНК хламидии трахоматис, назначается химиотерапия, после чего проводится культуральная диагностика, позволяющая исключить ложноположительный результат. В случае невозможности провести культуральную диагностику через некоторое время после лечения (5-6 недель) пациента направляют на повторный анализ на хламидии. Хламидия трахоматис очень опасна своими последствиями, поэтому лечение при ее выявлении занимает достаточно длительное время.

Сегодня ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем) получили широкое распространение. В большинстве случаев инфицированию способствует незащищенный половой контакт. В число возбудителей попадают и другие факторы: инфекция способна передаваться через вещи, воду и т. д. Очень часто заболевания подобного рода протекают скрытно, часто симптомы начинают проявляться уже на достаточно запущенных стадиях развития. Традиционные анализы не всегда способны выявить возбудитель ЗППП. Исследование методом ПЦР позволяет получить развернутый ответ. Как известно, запущенные стадии заболеваний тяжело поддаются лечению. Высокая стоимость анализа крови на хламидии (метод ПЦР) оправдывается возможностью получить точный диагноз.

Точная расшифровка анализов играет очень большую роль в лечении болезни, поэтому стоимость анализа не должна влиять на принятие окончательного решения. Перед тем как сдавать кровь, биологическую жидкость, мазок или любой другой материал на проведение анализа на хламидии методом ПЦР следует получить консультацию у врача.

Сдавать анализ на хламидии методом ПЦР рекомендуется натощак. Расшифровка анализов, как правило, занимает не более нескольких часов, соответственно, получить результат анализа крови пациент может уже на следующий день.

Титр к иммуноглобулинам хламидийной инфекции

Что означают обнаруженные титры к хламидии? 

В микробиологии метод титрования часто служит для определения концентраций микроорганизмов в тестируемом биологическом материале.

Своего рода, это количественный показатель, с помощью которого можно определить присутствие, а также концентрацию уровня антитела к хламидиям.

Иммуноглобулины Igg, Igм, Igа к хламидии трахоматис определяются в ходе проведения ИФА-анализа.

Повышение титра отмечается при активном защитном процессе иммунитета в ответ на проникновение в организм Chlamydia trachomatis. 

В лабораторной диагностике существует несколько результатов, которые можно получить в ходе тестирования биологического материала на хламидиоз: 

• Иммуноглобулины (антитела) не обнаружены. Данное заключение говорит об отсутствии инфекционного процесса, спровоцированного бактерией Chlamydia.
• Антитела Igg к хламидии трахоматис низкий титр, Igм высокий (положительный). Результат свидетельствует о протекающем заболевании в острой форме и сравнительно недавнем инфицировании. 
• Титр IgM низкий показатель, IgG высокий. Такой результат говорит о хроническом течении инфекции. При таком результате может наблюдаться такое явление как: антитела в крови к хламидии есть, но в мазке бактерий нет. Подобное связано с минимальной активностью патогена в мочеполовом тракте. 
• Иммуноглобулины IgG и IgM имеют одинаково высокие титры. Подобное свидетельствует об обострении патологического процесса, где заражение было более четырех недель назад. 

В обязательном порядке при назначении ИФА-анализа проводится исследование, направленное на обнаружение Chlamydia на слизистой урогенитального пути.

Подобный комплекс диагностических мероприятий важен для определения наиболее эффективного лечения инфекции.

Симптоматика и признаки хламидиоза у женщин и мужчин

Исследования, проводимые методикой ПЦР, делают с целью диагностирования инфекций, провоцирующих следующие вирусы, как микоплазма, уреаплазма, хламидии и прочие. Для обследования наличия хламидиоза и прочих инфекционных заболеваний, нужно сдавать кровь на анализы, мазки на бактериологический посев либо соскоб.

Если сдать мазок на посев либо соскоб, то хламидиоз, как наиболее коварное заболевание, передающееся при половых контактах, может не обнаружиться. Ведь атипичные бактерии, как хламидии, размножаются и концентрируются внутри иных клеток организма. Именно потому, такое заболевание, как хламидиоз (и уреаплазма), практически не идентифицируется при исследованиях в рамках привычных анализов.

Период инкубационного развития хламидий до определения выраженной симптоматики длится до 3-х недель. Именно за это время инфекция успевает встроиться в клетку организма, как у мужчин, так и у женщин. Диагностика ПЦР позволяет раньше выявить вирус и не дать распространится такому возбудителю, как уреаплазма.

Когда организм уже захвачен болезнью, проявляется следующая симптоматика у мужчин:

• это моча мутного цвета;
• утренние выделения из мочеиспускательного канала;
• зуд и признаки жжения при мочеиспускании;
• общее состояние слабости с повышением температуры тела;
• выделения с кровянистыми примесями при мочеиспускании и даже наблюдается такое, как кровянистое семяизвержение.

Признаки заболевания хламидиозом у женщин это:

• присутствие неприятного запаха гениталий;
• желтоватые выделения слизистого состава из влагалища;
• зуд и неприятное жжение в процессе мочеиспускания;
• слабость самочувствия с незначительным повышением температуры.

Антитела к хламидии трахоматис и их значение

Антитела — иммуноглобулины позволяют определить длительность протекающей инфекции в организме и ее стадийность. 

Существует следующие типы антител к хламидиям в крови:

• Иммуноглобулин А (IgA). Основная физиологическая роль IgA заключается в участии в иммунных реакциях на слизистых оболочках. Количество IgA, синтезируемого в организме человека в течение дня, больше, чем у всех других иммуноглобулинов, вместе взятых. Хотя концентрация этого иммуноглобулина в плазме крови невелика, подавляющее большинство его секретируется на поверхности слизистых и серозных оболочек. Спонтанное увеличение титра будет говорить об обострении хламидии. Увеличение IgA будет отмечаться спустя 8-12 недель после заражения. 
• Иммуноглобулин М (IgM). Иммуноглобулины первой линии, секретируются на ранних стадиях В-клеточного иммунитета, устраняют патогены до того, как образуется достаточные количества IgG. Получение положительного ответа в ходе диагностики будет говорить о стремительном инфекционном процессе. Антитела типа IgM появляются спустя 20 дней после заражения хламидиозом, а снижение показателей не всегда свидетельствует о выздоровлении. 
• Иммуноглобулины G (IgG). Это иммунный белок, вырабатываемый клетками иммунной системы — плазматическими клетками, которые являются типом B-лимфоцитов. Антитела IgG действуют очень специфично, потому что они всегда направлены против определенного антигена и в основном вырабатываются на более поздних стадиях иммунного ответа, заменяя менее специфичные антитела IgM.

Антитела Igg к хламидии трахоматис можно обнаружить спустя 2 недели после инфицирования. 

При получении результатов диагностики в виде Igg (+) и Igм (+) необходимо начинать лечение хламидии трахоматис.

Антитела к хламидии в виде Igg (+), Igg (-) указывает на то, что организм перенес инфекцию.

В случае повышенного уровня IgG, через 3 недели тест должен быть повторен.

Подготовка организма к анализу ПЦР

Для того, чтобы правильно провести анализ ПЦР на хламидии, необходимо подготовиться:

• за несколько дней не принимать антибиотики и антибактериальные средства;
• не мочиться до забора соскоба с уретры минимум в течение 3 часов;
• перед сдачей крови на анализ — не заниматься сексом 2 — 3 дня;
• минимум за 2 дня прекратить прием контрацептивов и других лекарственных средств;
• процедуры интимной гигиены необходимо провести без мыла и вечером накануне перед анализом;
• минимум за 3 дня до ПЦР не принимать алкоголь;
• кровь для ПЦР сдается на пустой желудок;
• во время менструации анализ ПЦР не делается.

Если количество бактерий сhlamydia psittaci и сhlamydia pecorum превышает показатель 10 в 4 степени, тогда лечения заболевания хламидиоз не избежать. При назначении лечения необходимо учитывать количественный показатель инфекции, а также чувствительность сhlamydia psittaci и сhlamydia pecorum к различным группам антибиотиков.

Как правильно сдавать анализ на хламидии женщинам?

Женщины анализ на хламидии методами ПЦР или NASBA могут сдать у врача-гинеколога, дерматовенеролога.

Материалами для исследования у женщин обычно служат:

Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала вне менструации. Условием является наличие в забранном материале клеток эпителия. При взятии обычного мазка, слизистого отделяемого, гноя и тому подобного, результат может быть не информативным.

Соскоб на анализ у женщин берут из наружного отверстия уретры, цервикального канала и заднего свода влагалища.

1. 1При использовании универсального зонда: после взятия материала рабочая часть зонда отламывается и погружается в пробирку «Эппендорф» с консервирующим раствором.
2. 2При использовании ложечки Фолькмана: ее ополаскивают в пробирке с консервирующим раствором. После этого емкость плотно закрывают, а инструмент дезинфицируют и стерилизуют.

Первая порция свободно выпущенной мочи. Именно в первой порции мочи сосредоточено максимальное количество слущенных эпителиальных клеток урогенитального тракта. У женщин первая порция свободно выпущенной мочи менее информативна (чувствительность 80-90%), поэтому применяется намного реже, чем соскоб. При этом нет доказательств, что утренняя моча более диагностически значима, чем, например, дневная (уровень обоснованности II).

Моча собирается пациенткой самостоятельно в чистый стерильный сухой контейнер. Для исследования достаточно порядка 10 мл мочи. Рекомендуемый период хранения  — 24 часа при соблюдении необходимого уровня температур (+2С…+8С).

Общие сведения

Хламидиоз относится к венерическим заболеваниям, которые передаются половым путем и представляют немалую опасность для здоровья человека. Причиной хламидиоза считают внутриклеточных микроорганизмов – хламидий.

В наше время среди мужчин и женщин чаще всего выявляют генитальную форму болезни. Хламидии обладают способностью повреждать эпителий половых органов, что приводит к формированию осложнений в виде заболеваний мочеполовой системы.

Достаточно часто инфекционный процесс приводит к появлению:

• воспаления уретры;
• эндоцервицита;
• артрита;
• бесплодия;
• патологических процессов во время вынашивания ребенка.

Если возбудитель заболевания атакует мужчин, то у них может развиваться:

• простатит;
• цистит;
• атрофия предстательной железы;
• эпидидимит;
• проктит.

Лечение хламидиоза должно проводиться только традиционными методами с применением антибактериальных препаратов, в противном случае эффекта наблюдаться не будет.

Что касается выявления заболевания у мужчин и женщин, то оно проводится:

• культурной методикой – осуществляется забор биологического материала на питательные среды;
• молекулярно-биологической методикой – ПЦР;
• взятием мазков на цитологическое обследование;
• серологическим исследованием или ИФА – данный способ позволяет осуществить определение наличия в сыворотке крови человека антител к возбудителю заболевания.

Теперь рассмотрим метод ПЦР-диагностики более детально.

Техника забора материала для анализа ПЦР

Диагностика хламидиоза считается задачей не из легких, ведь присутствие возбудителя невозможно обнаружить при обычном осмотре или при проведении исследования мазка на микрофлору.

У женщин мазок на хламидии методом ПЦР берут из влагалища, для этого используют специально предназначенные пластиковые зонды. После взятия материала их помещают в пробирку, содержащую транспортную среду (муколитик розового цвета). Данная пробирка стерильная, использовать ее разрешается только один раз.

У мужчин проводят соскоб с урогенитального канала. Головку члена протирают физиологическим раствором, проводят массаж уретры и вводят зонд в мочеиспускательный канал на 1–2 см. После этого его помещают в стерильную пробирку, которая плотно закрывается.

Проведение ПЦР

Материал для лаборатории получают пластиковым зондом или гинекологической щеткой. Полученные вещества собирают в коническую герметичную полуторамиллилитровую пробирку, заполняют незанятое пространство розоватой средой.

Пробирки одноразовые, стерильные. Материалы для исследования на хламидии получают из уретры, шейки матки. Недопустимо, чтобы мазок содержал кровь, поэтому соскоб берут аккуратно.

Изучение биоматериала производится амплификацией. Процесс дает точный результат за 6-8 часов. При этом происходит копирование последовательности ДНК за счет ДНК-полимеразы. На каждом цикле внедряется праймер. Смену циклов обеспечивают температурным режимом.

Высокая чувствительность — преимущество ПЦР на хламидии в сравнении с ИФА и иммунофлюоресцентны исследованием.

Реакция происходит в три стадии:

1. повышение температуры до 94°С превращает молекулу ДНК в одноцепочную (денатурация);
2. связываются короткие синтетические фрагменты с заданными участками белковых цепей (отжиг);
3. синтезируются новые ДНК при нагреве до 70-72°С (полимеризация).

Точность гарантирована исключением перекрестных реакций.

Как подготовиться к анализу?

Достоверность результатов метода полимеразной реакции зависит не только от безупречной техники забора биоматериала, но и от качества подготовки самого пациента.

Сдавая анализ крови или другого исследуемого биологического вещества на ПЦР, рекомендуется соблюдать такие правила:

• отменить прием антибактериальных лекарств на данный период;
• полностью исключить половую жизнь за 2-3 недели до проведения обследования;
• кровь на хламидии следует сдавать утром и натощак;
• диагностику желательно выполнять в период обострения заболевания;
• перед забором урогенитального мазка запрещается спринцевание исследуемой области;
• нельзя проводить ПЦР во время менструации у женщин (разрешается только на 2-3 день после месячных);
• образец мочи на хламидии берут утром, в стерильную посуду.

Не рекомендуется перед сдачей урогенитального мазка на полимеразную цепную реакцию посещать уборную за 3 часа до исследования. Накануне выполнения анализа, определяющего наличие хламидий и других инфекций в организме, следует воздержаться от похода в баню или сауну.

Как расшифровывается анализ?

Лаборатории представляют отчет об исследовании в традиционном виде, при котором не требуется пояснение, результат будет или «положительно» либо «отрицательно». Результат обследования ПЦР на хламидии готовиться на протяжении 1-3 суток. В некоторых учреждениях существует срочный анализ, который предоставляется платно. Заключение пациент получает «на руки» в течение 2-3 часов после выполнения диагностики.

Проведение анализа

Анализ, основанный на цепной реакции мелких частиц ДНК под воздействием ферментов, происходит в несколько этапов. Пациент соблюдает все рекомендации врача и тщательно подготавливается к сдаче образца. Исследование ПЦР начинается с забора крови или биоматериала с половых органов пациента с подозрением на хламидиоз. Если для дальнейших лабораторных исследований берутся соскобы, то мужчины проходят процедуру в кабинете уролога, а женщины обращаются к гинекологу.

У представителя сильного пола процесс занимает больше времени, так как для взятия образца необходимо воспользоваться специальными инструментами: ложечкой и зондом. Приспособления для забора биоматериала вводятся непосредственно в уретру мужчины, а затем аккуратно извлекаются образцы для проведения анализа. Зонд помещается в подготовленную очищенную пробирку (заполнена транспортной средой). Схожим образом собирается биоматериал из влагалища женщины. В особых случаях, когда забор образца из уретры невозможен (по разным причинам), у мужчин берутся слюна, моча после массажа простаты или эякулят. После взятия соскоба, полученные образцы отправляются в лабораторию для дальнейших исследований.

Расшифровка результатов

В быстрой и точной диагностике важны не столько способы забора биоматериала, как результаты, которые следует правильно расшифровать. Для человека без медицинского образования, понять заключение лабораторных исследований невозможно. Диагноз ставится на основе:

• опроса пациента (составленный на первичном осмотре анамнез);
• двух и более результатов лабораторных исследований;
• сопутствующих заболеваний, которые были обнаружены в ходе комплексного обследования организма.

Отрицательные результаты ПЦР свидетельствуют об отсутствии патогенных микроорганизмов в исследуемом образце. Положительный результат говорит о наличии возбудителя паразитарного заболевания в теле человека. Такой метод диагностики позволяет увидеть состав микрофлоры половых органов.

Почему мазок ПЦР на обнаружение хламидии считается наиболее точным? Сдача биоматериала для дальнейшего исследования таким методов позволяет получить быстрые результаты, что немаловажно при запущенном заболевании. Разные методики забора образца помогают избежать противопоказаний для беременных, женщин с гормональными сбоями и мужчин, которым не удается сдать соскоб

ПЦР помогает определить множество возбудителей опасных заболеваний. Безопасный метод используется на любых стадиях болезни, которая передается через половой контакт.

Расшифровка результатов анализов на хламидии

В процессе интерпретации результатов учитывается коэффициент позитивности при Chlamydia trachomatis.

Если значение не превышает 0,9, это говорит об отрицательном результате — хламидиоза нет.

Также подобное значение может говорить о проведении эффективной и успешной терапии.

В таком случае титр к антителам хламидии будет не более 1:5.

При положительном результате показания будут начинаться от 1,1, что будет свидетельствовать об инфицировании не более 20 дней назад.

Также подобные результаты можно получить сразу после лечения, поэтому анализы рекомендуется сдавать спустя 14 дней после завершения терапии. 

Титр хламидий в крови имеет тенденцию нарастать при остром течении инфекции.

В случае ремиссии или полного излечения титр снижается. 

Если пациент получил результаты в виде показателей от 09 до 1,1, проводится повторная сдача анализов.

В данном случае значения расцениваются как сомнительные.

Повторные тестирования проводятся спустя 5-6 дней. 

Нормы титров на хламидии не должны превышать показатель 1:10.

Преимущества и недостатки методики

Анализ ПЦР хламидии имеет ряд своих преимуществ и недостатков.

Благодаря преимуществам его часто назначают различным пациентам, обратившимся к доктору с симптоматикой, характерной для хламидиоза.

А из-за недостатков нет возможности использовать его, как скрининговый метод.

К преимуществам относят:

• чувствительность метода, благодаря которой можно обнаружить даже минимальное количество патогенных микроорганизмов в теле пациента;
• возможность использовать подход не только в стадию обострения хламидиоза, но и в период инкубации, в латентном периоде, а также при подозрении на носительство;
• для того чтобы выполнить исследование, подойдет практически любой материал, начиная от мазка с половых органов, и заканчивая кровью, полученной из вены;
• быстроту получения результатов (в среднем человек может получить итоги анализа на руки уже на следующий день после того, как материал будет собран, а в некоторых случаях результаты могут быть получены прямо в день исследования);
• анализ направлен на выявление самой бактерии, а не антител к ней, что сводит к минимуму вероятность получения недостоверных результатов.

Еще одним преимуществом ПЦР является возможность диагностировать одновременно с хламидиозом и другие ЗППП.

Например, болезнь часто сопровождается трихомониазом, гонореей, кандидозом, цитомегаловирусной инфекцией.

Все эти патогены можно обнаружить во взятом единожды биологическом материале пациента.

Несмотря на большое количество преимуществ, недостатки у методики все же сохраняются.

Среди них:

высокие требования к оснащению лаборатории, где будут исследоваться образцы, тщательное соблюдение санитарно-гигиенических норм;

• сохранение невысокой вероятности получения ложноотрицательных или ложноположительных результатов из-за неправильной подготовки пациентов, неверного действия лаборантов;
• сложности с интерпретацией итогов исследования, которые может правильно оценить только опытный доктор, хорошо знакомый с заболеванием и его особенностями;
• высокая цена на исследование, что делает его недоступным для значительно числа пациентов.

Однако даже недостатки не могут заставить докторов отказаться от применения ПЦР в диагностике хламидиоза.

Ведь это исследование остается самым точным из всех возможных вариантов, а значит, прогноз лечения улучшается.

Как проводится процедура взятия материала

Берется мазок в амбулаторных условиях, то есть при посещении гинеколога в его кабинете. Сама процедура проходит на гинекологическом кресле и по времени занимает несколько минут. Кроме подготовки пациентки, о которой было написано выше, необходимо, чтобы были выполнены следующие условия:

• анализы у беременных и не только должен брать опытный специалист;
• процедура должна проходить в условиях асептики, то есть инструментарий должен быть стерильным и по возможности одноразовым;
• цель специалиста: правильно сделать соскоб, в котором будут содержаться эпителиальные клетки без дополнительных включений.

В первом триместре беременная женщина сдает мазок не только из влагалища, но и из канала шейки матки, а также мочеиспускательного канала. На поздних сроках исследованию подлежат влагалищные выделения. Если обнаружен хламидиоз при беременности, то гинеколог может назначить повторный анализ и только после этого женщине предлагается пройти курс антибактериальной терапии препаратами, которые не представляют опасности для плода.

Мазок берется с помощью специального зонда, после чего его рабочая часть погружается в пробирку со специальным консервирующим составом. Если мазок берется ложечкой Фолькмана, то ее погружают в пробирку с консервирующей средой, ополаскивают, после чего подвергают дезинфекции и стерилизации. Емкость с материалом закрывают и отправляют на исследование.

Важно помнить, что пройти диагностику должен и половой партнер женщины, так как признаки заболевания могут появиться вновь. Сами по себе они не так опасны, как осложнения

Интерпретация результатов анализов на хламидиоз

Точность того или иного метода диагностики мы рассматривали выше, теперь разберемся, как трактовать полученные результаты с учетом поправки на ошибку.

При этом считается, что мазок берет опытный венеролог с соблюдением всех требований.

Сразу пару слов и микроскопии: метод при хламидиозе не информативен, клинической ценности практически не представляет.

Культуральный посев

Есть рост – есть инфекция, нужно лечить.

Контрольные анализы после лечения должны стать отрицательными.

Для подтверждения выздоровления, посев материала мазка повторяют еще один раз через 7-14 дней.

Молекулярно-биологические методы

Такие тесты стоит считать наиболее ценными.

Положительный результат ПЦР или NASBA в мазке из любого места – признак инфекции.

Негативный означает, что женщина здорова, либо материал был взят некачественно.

Контрольные после лечения ПЦР нужно сдавать дважды с периодом в 1-2 недели.

Так как метод может реагировать на ДНК погибших возбудителей (ложноположительное срабатывание).

NASBA такого недостатка лишен, но из-за цены анализа широко для контроля выздоровления не применяется.

Серологические анализы

Отрицательные указывают либо на то, что с момента заражения прошло менее 8 дней, либо на то, что женщина не заражена хламидиями.

Однако у 12-15% женщин при отрицательных анализах крови, в мазках из подозрительных мест, ПЦР и бакпосевом находили хламидий. Интерпретация положительной плазмы зависит от того, какие виды иммуноглобулинов обнаружены:

• Когда в крови находят IgA и IgM к хламидиям, анализы малоинформативны из-за низкой специфичности таких классов антител.
• Если в крови только IgG, заражение случилось больше 2 месяцев назад, имеет место хронический процесс.
• Смесь всех трех видов иммуноглобулинов говорит за обострение давнего хронического хламидиоза.

Второй момент – титры или концентрация IgG.

Если в сыворотке женщины, взятой через 10-12 дней после первого анализа, концентрация иммуноглобулинов нарастает в 4 и более раз, идет активное воспаление.

Если же титр остается прежним или немного снижается, то процесс хронический стабильный.

Важно помнить: титры иммуноглобулинов G падают, начиная с 1,5 месяца после успешного лечения. Подобное явление бывает причиной ситуации, когда мазок уже отрицательный (ПЦР или посевом), а анализ крови еще остается положительным

Подобное явление бывает причиной ситуации, когда мазок уже отрицательный (ПЦР или посевом), а анализ крови еще остается положительным.

Сохранение одной и той же концентрации в течение 2 месяцев – сигнал к повторному обследованию и новому курсу терапии.